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免疫熒光技術實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

英文名稱   Anti-Phospho-VASP(Ser157)
中文名稱  磷酸化擴張刺激磷蛋白抗體
濃    度  1mg/1ml 
規(guī) 格  0.1ml/100μg
抗體來源  Rabbit
克隆類型  polyclonal 
交叉反應   Human, Mouse, Rat, Dog 
產品類型     一抗 磷酸化抗體
別    名  VASP(phospho S157); Vasodilator-stimulated phosphoprotein; Vasodilator-stimulated phosphoprotein； VASP； VASP_HUMAN.
研究領域    細胞生物 免疫學 神經生物學 信號轉導 細胞凋亡 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶
蛋白分子量   predicted molecular weight: 40kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human VASP around the phosphorylation site of Ser157
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲 存 液   0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1%
產品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗體制備：

1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

抗原準備：
經常使用的抗原有：偶聯多肽、偶聯的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節(jié)約抗原等目的，通常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區(qū)別：
由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原（大分子抗原、半抗原偶聯物）刺激機體產生免疫反應，有機體漿細胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價測定：采用瓊脂擴散法。
⑴ 將血清倍比稀釋，加入外周孔。
⑵ 中間孔加動物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴24 小時后觀察結果。 

實驗原理：

（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 
（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 
（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，參與免疫應答。 
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗體對理化因子的與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在 上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
人神經元細胞完全培養(yǎng)基 100mLD-GalactosamineHC1D-半乳糖胺鹽酸鹽5KU高，98%

NRK-49F細胞，大鼠腎成纖微細胞 RT4(細胞) 豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3甜菜減;甘安醋三安內鹽;三銨內鹽 Bqtcinq;Lycinq;Glycocoll bqtcinq;Glycinq bqtcinq;TriMqthyl glycocoll cnhydridq;Oxynqurinq;DiMqthyl scrcosinq;(CcrboxyMqthyl)triMqthyl cMMoniuM xy7nochloridq innqr sclt;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM innqr sclt;Bqtcinq cnxy7nous 107-43-7

EFNA3 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 標簽)噻唑藍 (培養(yǎng)級) Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide (ce... 298-93-1 100MG 染色劑

C918(人眼脈絡色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 原代神經膠質細胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝：1mlChromiumpicolinate羧酸100微升AR，98%

人膀胱基質成纖維細胞HBdSF(脂多糖、內)
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN水合萜品shēng huà shì jì容量：500克

Walker氏癌256瘤株;W256 細胞，U251細胞 WEHI 231細胞，小鼠B細胞胰激肽原酶 Kallikrein from porcine pancreas 9001-1-8 5G 通用試劑

5637, 人細胞 Human異 97% Isoinoneolinq 119-62-3

CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 人細胞裂解液 (陽性對照) 丙酯，英文名或英文縮寫：Propyl pxenylacetate，級別：BR，98%，規(guī)格：5克

角質細胞培養(yǎng)基(特定)KM-d(4-metxylumbelliferyl-
IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人細胞裂解液 (陽性對照) 制霉素（標準品）Nystatin質量規(guī)格：效價測定

主動脈內皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)磺芐西林（標準品）SULBENICILLIN質量規(guī)格：效價測定

MST1R Others Human 人 MST1R / CD136 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酰螺旋霉素（標準品）Acetylspiramycin質量規(guī)格：效價測定

L-O2 人正常胎肝細胞三氯氨鉑酸鉀Potassium trichloroammineplatinate(II)質量規(guī)格：>95%

CM-H019人上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL西索米星（標準品）Sisomicin質量規(guī)格：效價測定
磷酸化擴張刺激磷蛋白抗體直銷AZU1 Others Human 人 AZU1 / Azurocidin 1 / HBP 人細胞裂解液 (陽性對照) 地達諾辛；去羥肌苷Dideoxyinosine;Didanosine質量規(guī)格：>98%,BR

人內皮細胞RNAHLEC miRNA5 μg羊藿苷IIcariin I;  Icariside I質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

小鼠垂體細胞(MPC)(5×105)寶藿苷II；大花羊藿苷A；意卡瑞苷A(標準品)Baohuoside II質量規(guī)格：HPLC≥97%,標準品

山羊皮膚成纖維樣細胞;DG-S1槐屬苷(標準品)Sophoricoside質量規(guī)格：HPLC≥98%,標準品

小鼠色素瘤瘤株;B16 小鼠皮膚肥大細胞完全培養(yǎng)基 100mL槐屬苷Sophoricoside質量規(guī)格：HPLC≥98%,BR

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