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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3933 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
杜氏利什曼蟲病原蟲PCR檢測試劑盒直銷 | Leishmania donovani()PCR | BKP3933 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
中國倉鼠肺細(xì)胞;CHL乙基纖維素shēng huà shì jì容量：500毫克
FSTL3 Others Mouse 小鼠 FLRG 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) *lpha-雄-16-1-3alpha-醇 5cLPHc-cNDROST-16-qN-3cLPHc-OL 1123-21-1
MLF, 小鼠成纖維細(xì)胞氧化鋁60GF425shēng huà shì jì容量：RT10克
KLRK1 Others Human 人 NKG2D / CD314 / KLRK1 CHO細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鄰啰啉鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100ku
人成纖維細(xì)胞RNAHMF miRNA5 μgPyroninB 1g/5g/10g原裝 Amresco 0724
IL24 Others Human 人 IL-24 / Ierleukin-24 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 替加氟Tegafur質(zhì)量規(guī)格：>98%
DCE 雞胚成纖維細(xì)胞替加氟（標(biāo)準(zhǔn)品）Tegafur質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測定
CM-M093小鼠胎兒真皮成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL阿昔莫司，阿西莫司Acipimox質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BR
293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細(xì)胞系阿昔莫司，阿西莫司（標(biāo)準(zhǔn)品）Acipimox質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0901 人真皮上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿達(dá)帕林Adapalene質(zhì)量規(guī)格：>98.5%
杜氏利什曼蟲病原蟲PCR檢測試劑盒直銷IL4R Others Rat 大鼠 IL4R / Il4ra 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rA5’-DMT-2’-TBDMS-Bz-rA質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
人導(dǎo)管癌細(xì)胞;ZR-75-30DMT保護(hù)性脫氧肌苷DMT-dI質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
OS-RC-2細(xì)胞，人細(xì)胞 小鼠細(xì)胞,CT-26.WT細(xì)胞 CL-0194RF/6A(猴視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×25‘-腺嘌呤核苷酸二鈉鹽(AMP2Na)5'-AMP-Na2質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
V79(倉鼠肺細(xì)胞) 5×106cells/瓶×25-溴-2’-脫氧尿苷(BRDU)5-Bromo-2-deoxyuridine質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
NHEM.f-c 正常人表皮素細(xì)胞(NHEM)少年者 500,000cells 視網(wǎng)膜muller細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)胞苷；胞嘧啶核苷Cytidine質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR，可用于細(xì)胞培養(yǎng)
人肺轉(zhuǎn)化細(xì)胞;AE1201ABAS-誘抗素2000UUSP級，95%
人平滑肌細(xì)胞(HCSMC)(5×105 )1，2，3，4-丁烷四羧醋 1,2,3,4-Butcnqtqtrcccrboxylic ccid 1703-28-8
CL-0358HKC(人胚腎上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2大理石;云石 Mcrblq 471-34-1
人細(xì)胞;AsPC-1 大鼠皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLVANCOMYCINxy7noCHLORIDE鹽酸萬古霉素美國藥典級100MG1404-93-9Frozen
EMT-6 小鼠癌3182-93-2L-本酸乙酯鹽酸鹽etxyl L-pxenylalaninate xy7nochloride
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：杜氏利什曼蟲病原蟲PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
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