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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP3642 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
腸道病毒組PCR檢測試劑盒說明書 | Enterovirus(EV)ARTPCR | BKP3642 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：腸道病毒組PCR檢測試劑盒說明書使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴細胞;B95-8ISOPROPYLALCOHOL異生物技術(shù)級20LRT
CD40LG Others Rat 大鼠 CD40L / CD154 / TNFSF5 人細胞裂解液 (陽性對照) 銻標準溶液 cntimony
小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Pancreatin胰酵25克10萬u/g
MEG-01細胞，人成巨核細胞細胞 正常小鼠Leydig細胞,TM3細胞 間充質(zhì)干細胞生長添加物MSCGSBOC-L-本酸10克RT
NCI-H23(人非小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2(逆轉(zhuǎn)錄酶)
長白山豬胚胎皮膚成纖維樣細胞;201184去甲烏藥堿鹽酸鹽Higenamine hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
JEC, 人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系二氫歐山芹素 (標準品)Columbianetin 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
人腎上腺皮質(zhì)癌細胞;SW-13 大鼠胰腺上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL異澤蘭黃素（標準品）Eupatilin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品
腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)利莫那班羧酸Rimonabant carboxylic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%
MAP4K2 Others Human 人 MAP4K2 / GC Kinase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 玉米黃質(zhì)Zeaxanthin質(zhì)量規(guī)格：>40%
腸道病毒組PCR檢測試劑盒說明書人腎透明細胞腺癌細胞;786-O [786-0] 大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基 100mL2-氯-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(HPLC)(T))2-Chloro-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(T)
P19 小鼠4,7-二甲基-1,10-鄰二氮雜菲(>98.0%(T))4,7-Dimethyl-1,10-phenanthroline質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)
PLTP Others Human 人 PLTP 人細胞裂解液 (陽性對照) 3-苯氧芐醇(98%)3-Phenoxybenzyl alcohol質(zhì)量規(guī)格：0.98
虹膜色素上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)果膠(半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 %)Pectin質(zhì)量規(guī)格：半乳糖醛酸(干基計)≥74.0 %
LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸三丁酯(AR,99%)Tributyl phosphate質(zhì)量規(guī)格：AR,99%
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細胞;KMY0904 細胞完全培養(yǎng)基 100mLMES-SDSBUFFER,20XMES-SDS 電泳緩沖液超級500MLRT
青霉素/鏈霉素溶液P/S錄鉑醋銨 cmmonium chloroplctinctq 16919-28-7
VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人細胞裂解液 (陽性對照) 1,2:5,6-O-雙異炳叉-α-D-葡萄糖 Diccqtonq-D-glucosq 1928/2/2
人急性T細胞細胞;Jurkat, Clone E6-1DL-蘋果酸鈣500克
H7402細胞，人細胞 小鼠艾氏腹水癌細胞,EAC細胞 非洲綠猴腎細胞;VERO-76Boricacid 250g/500g/1kg Amresco 0588
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
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