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本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
Sulfadiazine  68-35-9  中文名：磺胺嘧啶  分子式：C10H10N4O2S    兔壞死因子-a(rabbit TNF-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Rifampicin  13292-46-1  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12    兔干細(xì)胞因子(rabbit SCF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Dyphylline  479-18-5  中文名：二羥丙茶堿  分子式：C10H14N4O4    兔轉(zhuǎn)化生長因子-a(rabbit TGF-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Sulfamethazine  57-68-1  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S    兔轉(zhuǎn)化生長因子-β1(rabbit TGF-b1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Lomefloxacin hydrochloride  98079-52-8  中文名：鹽酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3    兔轉(zhuǎn)化生長因子-b2(rabbit TGF-b2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
Jacaranone  60263-07-2  中文名：  分子式：C9H10O4    Rat platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒

3-Hydroxychimaphilin  33253-99-5  中文名：3-羥基梅笠草素  分子式：C12H10O3    Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit 人可溶性內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Chimaphilin  482-70-2  中文名：梅笠草素  分子式：C12H10O2    HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISA試劑盒人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Prerubialatin  1667718-89-9  中文名：  分子式：C27H20O7    組織PAK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

(S)-4-Methoxydalbergione  2543-95-5  中文名：(S)-4-甲氧基黃檀醌  分子式：C16H14O3    Humanpermeabilityglycoprotein,P-gpELISAKit人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
狷羚病毒1型PCR檢測試劑盒直銷2,7-二叔丁基芴(>98.0%(GC))  2,7-Di-tert-butylfluorene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱RatDesminELISAKit大鼠結(jié)蛋白(Desmin)規(guī)格：96T/48T

9-芴酮(>98.0%(GC))  9-Fluorenone  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 酵母V型ATP酶(VtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20

9-芴醇(>95.0%(GC))  9-Fluorenol  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) ELISAKitAGEs人晚期糖基化終末產(chǎn)物規(guī)格：48T/96T

2-芴甲醛(>95.0%(T))  2-Fluorenecarboxaldehyde  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(T) 小鼠酶1(PON1)ELISA試劑盒 ，英文名： PON1 ELISA Kit

2-羥基-9-芴酮(>90.0%(HPLC)(T))  2-Hydroxy-9-fluorenone  質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(HPLC)(T) 人聚集蛋白(Agrin)ELISA檢測試劑盒HumanAgrinELISAKit 96T/48T

2-硝基芴(>99.0%(HPLC))  2-Nitrofluorene  質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(HPLC) 大鼠皮質(zhì)醇(Coisol)試劑盒 Rat Coisol ELISA Kit

9,9'-螺二[9H-芴](>98.0%(HPLC))  9,9'-Spirobi[9H-fluorene]  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) 英文名稱RatcalcitoningenerelatedpeptideELISAKit大鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

2-氨基蒽(>98.0%(GC)(T))  2-Aminoanthracene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) 酵母β-內(nèi)酰胺酶報(bào)告基因活性比色法定量檢測試劑盒20

1-氨基蒽(>98.0%(GC)(T))  1-Aminoanthracene  質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T) ELISAKitextein人外顯肽規(guī)格：48T/96T

9-蒽(>95.0%(GC))  9-Bromoanthracene  質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(GC) 小鼠對(duì)基苯(PABA)ELISA試劑盒 ，英文名： PABA ELISA Kit
DL-乳酸(USP)  DL-Lactic acid  質(zhì)量規(guī)格：88~92%，USP 動(dòng)物軟骨組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

檸檬酸三銨  Ammonium , tribasic  質(zhì)量規(guī)格：> 98%,AR 動(dòng)物軟組織線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20

鉻天青S(Ind Grade)  CAS, Chrome azurol S  質(zhì)量規(guī)格：Ind Grade 動(dòng)物腮腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

5'-三胞苷二鈉鹽  Cytidine-5'-triphosphate (CTP), di salt  質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí) 動(dòng)物上皮細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

纖維素酶(酶活>45 U/mg)  Cellulase  質(zhì)量規(guī)格：酶活>45 U/mg，BC 動(dòng)物神經(jīng)組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

派洛寧Y(Ind Grade)  Pyronin Y  質(zhì)量規(guī)格：Ind Grade 動(dòng)物腎上腺組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

魚精蛋白硫酸鹽來源于鮭魚   Protamine sulfate from Salmom  質(zhì)量規(guī)格：Grade II,sigma分裝 動(dòng)物組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10

5--4-氯-3-吲哚基鹽鈉鹽(分子生物學(xué)級(jí))  BCIP, di salt  質(zhì)量規(guī)格：分子生物學(xué)級(jí) 動(dòng)物糖蛋白刀豆蛋白A(ConA)樹脂法化試劑盒5

乙酸銅水合物(>99%，BR)  Copper(II) acetate, hydrate  質(zhì)量規(guī)格：>99%，BR 動(dòng)物糖蛋白電泳遷移檢測試劑盒5

肌酸鈉鹽四水  Creatine phosphate  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 動(dòng)物糖蛋白化學(xué)法完全糖基分解試劑盒20

特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：狷羚病毒1型PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。