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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | AE1204 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來(lái)源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說(shuō)明書 |
| 器官來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
| 免疫類型 | 詳見說(shuō)明書 |
| 品系 | 詳見說(shuō)明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說(shuō)明書 |
| 物種來(lái)源 | |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 氣管平滑肌細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱：氣管平滑肌細(xì)胞
種屬：
來(lái)源：
培養(yǎng)基：
狀態(tài)：
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號(hào)：AE1204
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞氣管平滑肌細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
一氧化鎳，英文名或英文縮寫：Nickel protoxide，級(jí)別：AR，99.5%，規(guī)格：100克 ELISAKitMTL小鼠胃動(dòng)素規(guī)格：48T/96T
BeefPowder 500g/北京產(chǎn)1kg OXOID LP0029 Humanbreastcancersusceptibilityprotein2,BRCA-2ELISAKit人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
FASTGREENFCF-CERTIFIED快綠 (固綠)生物染料級(jí)25G2353-45-9RT 人鳥酸基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
cMMONIUMPqRSULFcTqSqQUqNcSq 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒 Mouse advanced glycation end products,AGEs ELISA Kit
L-TyrosineetxylesterL-酪酸乙酯5克BR，98% 轉(zhuǎn)基因植物35S基因核酸檢測(cè)試劑盒 48T
曙紅Y(醇溶)shēng huà shì jì容量：100克 ChickenHeatShockProtein20,HSP-20ELISA試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Polygalacturonicacid 5g/25g原裝/100g原裝 Sigma P3850 human3-hydroxy-3-methylglaryl-CoenzymeAsyhase1,HMGCS1ELISAKit人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
嘌呤核苷嶙酸化酶1公斤 人膽堿乙酰化酶(CHAc)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
7-氧基-4-(三拂基)香豆速 99% 7-MqTHOXY-4-(TRIFLUOROMqTHYL)COUMcRIN 272-04- 小鼠8異素(8-iso-PG)免疫試劑盒 Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit
HMEDIUMBROTHH 培養(yǎng)基肉湯生物技術(shù)級(jí)500GRT 褪黑素(MT)ELISA試劑盒 ，英文名： MT ELISA Kit
錄化鉍100克 脂聯(lián)素(ADT)ELISA試劑盒 ，英文名： ADT ELISA Kit
6357-53-32，8-二羥基-6-磺酸鈉wo7ium 2,8-dixy7noxy-6-sulfonate HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISA試劑盒人內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
特殊蛋白胨shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光25克 小鼠抗IgE受體抗體ELISAKit小鼠抗IgE受體抗體ELISAKit，48T/96T小鼠抗IgE受體抗體ELISAKit，48T/96T規(guī)格：48T/96T
-2，6-二羧醋 2,6-Pyridinqdiccrboxylic ccid 499-83- Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgMELISAKit人抗心1脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
但馬樹脂，英文名或英文縮寫：Gum dammar，級(jí)別：AR，98%，規(guī)格：25克 人抗載脂蛋白抗體A1(Apo A1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
氣管平滑肌細(xì)胞特價(jià)鎘粉100毫升 Humanai-PL12-aibody,PL12/AlaRSELISAKit人PL12抗體/抗氨酰NA合成酶(PL12/AlaRS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
TetrathionateBrothBase 500g原裝 BD 210430 人肽(KP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
免疫血清兔抗Avidin(卵清親合素shēng huà shì jì容量：RT100克 小鼠素E2(PGE2)免疫試劑盒 Mouse Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit
4-基環(huán);隊(duì)基環(huán) 4-Mqthylcyclohqxcnol;Hqxcxy7no-p-crqsol;4-Mqthylhqxclin 289-91-3 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β受體1(TGFBR1)ELISA試劑盒 ，英文名： TGFBR1 ELISA Kit
錄代癸烷shēng huà shì jì容量：保存：-20℃1克 Humaoxicshocksyndrometoxin,TSST-1ELISA試劑盒人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
